Horatio Caine
Calleigh Duquesne
Ryan Wolfe
Natalia Boa Vista
Directeur du laboratoire criminel, Horatio Caine se passionne pour les incendies et les explosions. Il rejoint la police afin de retrouver l'assassin de sa mère mais il baisse les bras, s'ennuyant et trouvant que seule la police scientifique résout ces crimes. Il devient criminaliste et répète le même schéma mais Al Humphries lui offre un poste de commandant qui lui convient. Caine est très logique et met son instinct au même niveau que la science pour résoudre les crimes. Il se marie avec Marisol Delko mais celle-ci sera tuée par des trafiquants de drogues. En voulant retrouver ce malfrat, c'est le frère d'Horatio qui se fera assassiner.
Calleigh Duquesne fait ses premiers pas dans la police de la Nouvelle-Orléans où sa grande connaissance des armes à feu épate ses supérieurs. C'est ainsi qu'Horatio Caine la repère et lui propose de rejoindre l'équipe de Miami. Elle se spécialise ainsi dans la balistique. Au niveau sentimental, Calleigh a des relations avec le lieutenant Hagen (qui se suicide en fin de saison 3), Jake Berkeley et Eric Delko, ce dernier pourtant à l'origine de la rupture entre la jeune femme et Jake.
Ryan Wolfe analyse les traces et recherche des indices chez les Experts. Il a été remarqué par le lieutenant Horatio Caine sur la scène d'un accident de bus. Caine lui a immédiatement proposé d'intégrer son équipe. Dès ses premiers pas, Ryan est confronté à une affaire concernant le père de sa collègue, Calleigh Duquesne. Il doit également remplacer au pied levé Tim Speedle, qui a particulièrement touché les Experts.
Natalia Boa Vista a été engagée par le Miami Dade Police Department afin de traiter l'ADN d'affaires non-résolues. Ses collègues découvrent assez vite que Natalia a été victimes de violences conjugales. Ils parviennent à condamner Nick, son ex-mari. Mais Natalia est en réalité agent du FBI, chargée de monter un dossier à charge contre Horatio Caine. Désormais, elle est sur le terrain. Sa vie change quand Nick, son ex-mari violent, revient en tant que nettoyeur de scènes de crimes.